Implementation of in vitro screening assays to test inflammation. Thrombosis and endothelial function on cells

Author

Pons Llecha, Laia

Director

Sola Alberich, Rosa Maria

Date of defense

2010-01-28

ISBN

9788469315446

Legal Deposit

T-637-2010



Department/Institute

Universitat Rovira i Virgili. Departament de Medicina i Cirurgia

Abstract

Four cellular models have been developed to implement and standardise in vitro methodology to monitor the effect of food compounds or extracts on anti-inflammatory system, on endothelial function and on anti-thrombotic response: <br/>1. Induction of inflammation: Monocytes THP-1 cells challenged with Lipopolysaccharides and tumour necrosis factor-alpha (TNF-&#61537;) protein release and mRNA expression were assessed. <br/>2. Induction of endothelial dysfunction: HAEC challenged with TNF-&#945; and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) protein release and mRNA expression were determined. <br/>3. Assessment of endothelial function: HAEC were incubated with TNF-&#61537; and Insulin and mRNA expression of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) was determined. <br/>4. Study of thrombotic effects: HAEC were pre-incubated with resveratrol and then, challenged with TNF-&#945; to assess the tissue factor (TF) protein and mRNA expression. <br/>Thus, these in vitro cellular models are valid systems for the study of compounds or food extracts on mechanisms involved in the pathogenesis of atherosclerosis.


S'han desenvolupat 4 models per estandarditzar metodologia in vitro per supervisar l'efecte de compostos o extractes d'aliments en un sistema antiinflamatori, en funció endotelial i resposta antitrombòtica. <br/>1. <br/> Inducció de la inflamació: Es van estimular monòcits THP-1 amb Lipopolisacàrids i avaluar l'expressió proteica i del mRNA del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-&#61537;). <br/>Inducció de disfunció endotelial: Van estimular-se HAEC amb TNF-&#61537; i determinar l'expressió proteica i del mRNA de la mol·lècula d'adhesió vascular cel·lular (VCAM-1). <br/>Avaluació de la funció endotelial: Es van incubar HAEC amb TNF-&#61537; o Insulina i determinar l'expressió del mRNA de la endothelial nitric oxide synthase (eNOS). <br/>Estudi dels efectes trombòtics: Les HAEC van ser pre-incubades amb resveratrol i estimulades amb TNF-&#945; per avaluar l'expressió proteica i del mRNA del factor tissular. <br/>Aquests models cel·lulars in vitro són vàlids per estudiar compostos o extractes d'aliments sobre mecanismes implicats en la patogènesi de l'aterosclerosi.

Keywords

funció endotelial; Cultiu cel·lular inflamació trombosis

Subjects

61 - Medical sciences

Documents

Tesi.pdf

2.903Mb

 

Rights

ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs.

This item appears in the following Collection(s)